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PCR實(shí)驗(yàn)室整體解決方案和儀器清單

  • 時(shí)間:2020-06-24
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自新型冠狀病毒發(fā)現(xiàn)以來(lái),武漢市全部疾控中心都處于全面?zhèn)鋺?zhàn)狀態(tài),除了為武漢防控新型冠狀病毒疫情提供信息支持外,更是全面參與一線的防控工作中,特別是PCR實(shí)驗(yàn)室新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作。

Pcr實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室、DNA實(shí)驗(yàn)室,基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng),能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達(dá)納米級(jí)別,精確檢測(cè)乙肝病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否復(fù)制、是否傳染、傳染性有多強(qiáng)、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時(shí)判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗(yàn)依據(jù) 。


Pcr實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用場(chǎng)所:第三方醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所,司法鑒定機(jī)構(gòu),臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu),刑偵技術(shù)鑒定機(jī)構(gòu),農(nóng)牧業(yè)基因檢測(cè),食品行業(yè)轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè),食品藥品監(jiān)督所,疾控中心等。

Pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)備清單:

1、試劑制備區(qū)
功能:主要是作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備,試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過(guò)其它區(qū)域。試劑原材料需貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。

品類

選型用途

天平

用于精確稱量各類試劑

超凈工作臺(tái)

涉及對(duì)細(xì)菌的操作均需在超凈工作臺(tái)下完成

移液器

準(zhǔn)確量取特定體積溶液20-100ul

實(shí)驗(yàn)室超純水機(jī)

超純水18.2ΩM.CM

藥品冷藏箱

短期保存

試劑低溫冰箱

可選2-8°、-20℃

混勻儀

移取樣本前需要混勻

消毒車或過(guò)氧化氫空間滅菌器

空間環(huán)境消毒

滅菌鍋或干熱滅菌器

實(shí)驗(yàn)室物品、試劑、培養(yǎng)基消毒滅菌

PH計(jì)

配置試劑是精確測(cè)量PH值


2、 樣本制備區(qū) 
功能:臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)DNA的合成。

品類

選型用途

生物安全柜

為了防止有害懸浮微粒、氣溶膠的擴(kuò)散

樣本低溫冰箱

-20℃,-80℃保存樣本及DNA

高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)

用于收集微生物菌體、細(xì)胞碎片以及其他沉淀物。

有些樣品由于在常溫下不太穩(wěn)定,需要低溫環(huán)境。

水浴鍋或者金屬浴

用于DNA雜交過(guò)程中水浴控溫

移液器

準(zhǔn)確量取特定體積溶液

紫外燈或者過(guò)氧化滅菌器

空間環(huán)境消毒

混勻儀

移取樣本前需要混勻

超凈工作臺(tái)

涉及對(duì)細(xì)菌的操作均需在超凈工作臺(tái)下完成

低溫搖床

用于大腸桿菌和酵母菌的振蕩培養(yǎng)

磁力攪拌器

加速溶解固體內(nèi)容物




3、核酸擴(kuò)增區(qū)
功能:主要是DNA擴(kuò)增,已制備的DNA模板和合成的DNA和主反應(yīng)混合液,制備成反應(yīng)混合液等,也可以在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。在PCR測(cè)定中,通常在擴(kuò)增后須打開反應(yīng)管。

品類

選型用途

基因擴(kuò)增儀

基因檢測(cè)DNA/RNA擴(kuò)增

熒光定量PCR儀

核酸定量分析

核酸提取儀/ 分子雜交儀

樣品DNA/RNA提取

移液器

準(zhǔn)確量取特定體積溶液

紫外燈/過(guò)氧化滅菌器

空間環(huán)境消毒

超凈工作臺(tái)

涉及對(duì)細(xì)菌的操作均需在超凈工作臺(tái)下完成

純水裝置或實(shí)驗(yàn)室超純水機(jī)

用于PCR,DNA測(cè)序需要超純水



4、產(chǎn)物分析區(qū)
功能:主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定,如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測(cè),此區(qū)域可不設(shè)。

品類

選型用途

電泳儀

水平電泳用于核酸DNA/RNA檢測(cè),垂直電泳用于蛋白檢測(cè),轉(zhuǎn)印電泳用于將蛋白轉(zhuǎn)印到膜上做western檢測(cè)

凝膠成像系統(tǒng)/紫外檢測(cè)儀

用于核酸瓊脂電泳和蛋白聚丙酰胺的觀察和拍照;紫外分析儀用于染色后核酸瓊脂電泳膠觀察,不能連接電腦,

電爐

電泳瓊脂凝膠加熱融化